ATAC测序的全称是Assay for Transposase Accessible Chromatin using sequencing,运用测序手段研究转座酶可靠近的染色质的一种手艺。该手艺通过转座酶对某种特准时空下开放的核染色质区域举行切割,进而获得在该特准时空下基因组中活跃转录的调控序列。这项手艺仅需少量细胞便可获得实时全基因组活性调控序列信息,应用于转录因子团结剖析、核小体定位、活性调控元件漫衍等研究,在表观遗传机制研究领域有辽阔的应用远景。
ATAC-seq主要实验流程首先是制备细胞悬液,然后裂解液裂解细胞获得细胞核,进一步使用Tn5转座酶酶切并纯化,最后接纳DNA片断,对接纳片断举行最后修复、3’端加A、毗连测序讨论,片断巨细选择以及PCA扩增等办法获得标准的高通量测序文库,使用Illumina测序平台举行测序。
原始测序Reads经已往讨论和过滤低质量,获得Clean Reads。将Clean Reads与参考基因组序枚举行比对,通过Reads在基因组上的比对位置信息,举行Peak calling,并举行motif展望、转录因子靶基因挖掘、差别Peak和Motif中剖析。
动物组织(包括真菌)、植物组织(包括藻类)、冻存的细胞样品(基本笼罩所有物种)。
a) 细胞:>1×106
b) 动物组织:>50 mg
c) 植物组织:>500 mg